如何利用显微镜进行啤酒酵母细胞的计数?

一、      开篇语

酵母被称为啤酒酿造的灵魂。啤酒的风格、香气、甚至降糖速率、发酵周期、封罐时间都与酵母的状态和数量息息相关。今天,我们将告诉大家,如何正确使用显微镜进行酵母细胞的形态的观察和计数,以便于我们更精细化控制啤酒酿造过程,酿出更加优秀的作品。

二、      工具篇

我们用到的工具有:显微镜、血球计数板以及专用盖玻片、擦镜纸、镊子、塑料吸管、试管、试管架、移液器、洗耳球。

三、      样品篇

我们安琪BF16啤酒酵母酿造的淡爽拉格发酵液为例。一般发酵前期、后期可以直接取样观察,中期细胞数较多,观察不变,需要进行一定的稀释倍数,一般选择10~100倍即可。

(取样)这是发酵中期的样品,我们稀释10倍。将发酵液摇匀,移液器取出1ml,加入试管中,补加9ml无菌水,充分混匀。

血球计数板要浸泡在无水乙醇中保存,我们用镊子取出,使用纸巾擦拭干净,然后盖上盖玻片。用塑料吸管吸取少量稀释样品,从盖玻片一侧滴入一点,从另一侧用纸巾进行引流,使液体充满整个观察区域,纸巾吸收掉多余的样品。注意,一定是先加盖玻片再滴液体,如果顺序反了,会导致测定结果偏大。

四、      显微镜篇

首先,介绍一下显微镜的各个部件如下图:

 

(1)   镜背,是便于显微镜的移动,一手握住镜背,一手拖住底座进行移动。

(2)   目镜,眼睛观察细胞的地方,放大的倍数是16倍。

(3)   瞳距调节器,根据每个人的瞳距调节至舒适状态,便于观察。

(4)   镜头转换器与之相连的是物镜,通过旋转转换器可以调整物镜的使用倍数,观察酵母使用40倍即可。

(5)   载物台是放置观察样品的位置,片夹用于固定载玻片,标尺可以进行载玻片的移动,从而更换观察的视野。

(6)   粗准焦螺旋和细准焦螺旋的使用对我们观察啤酒酵母非常关键。我们先用粗准焦螺旋找到酵母细胞,再用细准焦螺旋将图像调整清晰。

(7)   聚光器和光源是调整亮度来控制视野的亮度,也是为了便于观察。

五、      观察篇

             介绍完显微镜,我们开始观察计数。

(1)   将血球计数板放到载物台上用片夹固定,调整至中央位置。

(2)   调整转换器,选择40倍物镜。

(3)   眼睛在一侧观察,逆时针调整粗准焦螺旋,使物镜轻轻触碰到载玻片,注意,用力过大可能将载玻片压碎。

(4)   眼睛观察目镜,顺时针缓缓调整粗准焦螺旋,仔细观察视野寻找酵母图像。

(5)   顺时针缓缓旋转细准焦螺旋,将酵母图像调整清洗。

(6)   上下左右轻轻移动标志位置,寻找到血球计数板的计数区域(计数室)。

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